感人肺腑
前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇感人肺腑范文，相信會(huì)為您的寫作帶來(lái)幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。
感人肺腑范文第1篇
1、我能想到最浪漫的事，就是和你一起慢慢變老，直到我們老的哪兒也去不了，你還依然把我當(dāng)成手心里的寶。
2、不管發(fā)生了什么事，我都會(huì)在你身邊陪伴著你，對(duì)你不離不棄。只要你有需要我的地方，我一定義不容辭的幫你。我不會(huì)離開(kāi)你我永遠(yuǎn)都是你最好的朋友。
3、有個(gè)懂你的人，是最大的幸福。這個(gè)人，不一定十全十美，但他能讀懂你，能走進(jìn)你的心靈深處，能看懂你心里的一切。最懂你的人，總是會(huì)一直的在你身邊，默默守護(hù)你，不讓你受一點(diǎn)點(diǎn)的委屈。真正愛(ài)你的人不會(huì)說(shuō)許多愛(ài)你的話，卻會(huì)做許多愛(ài)你的事。
4、你走了，帶著我全部的愛(ài)走了，只是一句分手。我忍著眼淚看著你的背影，好想最后在抱你一次，好想在對(duì)你說(shuō)一次“我愛(ài)你”。
5、茫茫人海我們能夠遇見(jiàn)并成為了朋友，說(shuō)明我們之間有緣分，而我的無(wú)心之過(guò)卻毀了它，對(duì)此我深感抱歉，希望你可以再給我一次做你朋友的機(jī)會(huì)？讓我們的緣分能夠一直持續(xù)下去。
6、朋友是琴，演奏一生的美妙，朋友是茶，品位一世的清香，朋友是筆，寫出一生一世的幸福和快樂(lè)，朋友是歌，唱出一輩子的溫馨，祝您天天快樂(lè)！
7、喜歡手被你握在掌心的那種感覺(jué)。想和你深愛(ài)到老，牽手一生。原諒我曾經(jīng)的任性和刁蠻。愛(ài)你！
8、如果愛(ài)你是上天交給我的任務(wù)，我愿意這個(gè)任務(wù)是永久，它不應(yīng)有期限。因?yàn)樯咸熘牢視?huì)好好的珍惜你的。
9、你的問(wèn)候是來(lái)致深山里的一股清泉，你的笑容讓我今生迷醉，遠(yuǎn)方的朋友讓我問(wèn)候你一聲還好吧。
10、你的心就是我的海角和天涯，我不能去得更遠(yuǎn)。我們此生共赴天涯海角，不是游走半個(gè)地球，而是人間相伴。
11、快樂(lè)要有悲傷作陪，雨過(guò)應(yīng)該就有天晴。如果雨后還是雨，如果憂傷之后還是憂傷，請(qǐng)讓我們從容面對(duì)這離別之后的離別。微笑地去尋找一個(gè)不可能出現(xiàn)的你。
12、往事如夢(mèng)似煙，多少甜蜜，多少懷念?？v然相隔遙遠(yuǎn)，你的情意永駐我心田。
13、一直以為幸福在遠(yuǎn)方，在可以追逐的未來(lái)。后來(lái)才發(fā)現(xiàn)，那些擁抱過(guò)的人，握過(guò)的手、唱過(guò)的歌、流過(guò)的淚、愛(ài)過(guò)的人、所謂的曾經(jīng)，就是幸福。在無(wú)數(shù)的夜里，說(shuō)過(guò)的話、打過(guò)的電話，思念過(guò)的人、流過(guò)的眼淚……看見(jiàn)的或看不見(jiàn)的感動(dòng)，我們都曾經(jīng)過(guò)，然后在時(shí)間的穿梭中，一切成為了永恒！
14、有了你我的生命多了希冀，我不會(huì)在今天哭泣，為了你我會(huì)努力，在受傷時(shí)忍住淚滴，大口的呼吸！
15、新衣會(huì)慢慢變舊，人會(huì)慢慢變老。時(shí)光流逝，斗轉(zhuǎn)星移，但我對(duì)你的愛(ài)將歷久彌新。我們的誓言也永不更改。
16、在人群之中尋覓著你，就彷佛在海邊掬起所有的沙粒，急于發(fā)現(xiàn)你的蹤跡，如果不從愿，但愿還有來(lái)生。
17、把你比作我的命實(shí)在太貶低你了，對(duì)于我而言你比什么都重要，我寧愿失去全世界也不愿失去你。
18、等待使我度過(guò)了漫長(zhǎng)的一個(gè)世紀(jì)，雖然我不知道你和你的明天在哪里，但我始終堅(jiān)信我愛(ài)你。只要心中有愛(ài)，我還可以為你度過(guò)另一個(gè)世紀(jì)，直到與你再次相遇，成為你的唯一。
19、當(dāng)歲月燃燒我的一切時(shí)，不能忘記的是你那一眼的風(fēng)情；當(dāng)我合上雙眼時(shí)，我渴望的仍是你那一眼的風(fēng)情！
20、每時(shí)每刻在看著你，我總覺(jué)得看不夠；天天呆在一起，我還覺(jué)得呆不夠；總想把你摟在懷，將你融化在我的愛(ài)里。
21、有一種情感在你我之間，有一種感謝，讓我無(wú)法表達(dá)；有一種歉意，讓我說(shuō)不出口；但唯一一種信物，就是舍不得你的離開(kāi)。
22、朋友是一輩子的事，不管歲月流逝，多久多遠(yuǎn)，我依然記得，那份曾經(jīng)共有的情誼，祝福你，永遠(yuǎn)的朋友！
23、一朵鮮花代表一份簡(jiǎn)單純潔的愛(ài)情，一束鮮花代表一段狂熱沖動(dòng)的愛(ài)情，一團(tuán)鮮花則代表一句一生一世的承諾！
24、每個(gè)夜晚來(lái)臨的時(shí)候，我心中都充滿期待。打開(kāi)電腦，心情的愉悅或失落在QQ閃現(xiàn)的那一刻定格。只是看著你閃亮的頭像就有說(shuō)不出的親切。當(dāng)你手指也許是隨意的擊打鍵盤時(shí)，我的不僅是文字，還有莫名的暖流涌入心田。
25、假如人生不曾相遇，我還是那個(gè)我，偶爾做做夢(mèng)，然后，開(kāi)始日復(fù)一日的奔波，淹沒(méi)在這喧囂的城市里。 我不會(huì)了解，這個(gè)世界還有這樣的一個(gè)你，只有你能讓人回味，也只有你會(huì)讓我心醉。 假如人生不曾相遇，我不會(huì)相信，有一種人可以百看不厭，有一種人一認(rèn)識(shí)就覺(jué)得溫馨。
26、傻是我的特長(zhǎng)，癡是我的理想，當(dāng)傻和癡交織在一起的時(shí)候，便是我夢(mèng)境里最美的天堂，別笑我，我就這么癡心，我會(huì)傻傻的愛(ài)你癡癡的戀你，一直到老。
27、如果有一天你覺(jué)得疲憊，只要一轉(zhuǎn)身，我的祝福就在你身邊，我的愛(ài)會(huì)一直守護(hù)你，我親愛(ài)的朋友。
28、不同的時(shí)間，不同的地點(diǎn)，不同的人群，相同的只有你和我；時(shí)間在變，空間在變，不變的只有對(duì)你無(wú)限的思念！
29、當(dāng)你不如意時(shí)，記得還有一個(gè)我陪你一起分擔(dān)，不管多麼不如意，相信你絕非不是一個(gè)人孤軍奮戰(zhàn)，因?yàn)槲視?huì)一直陪著你，直到你找到自已的避風(fēng)港。
30、不敢說(shuō)我會(huì)等你一輩子，因?yàn)槲覜](méi)有幾個(gè)四年可以去耗費(fèi)。但相信我會(huì)愛(ài)你一輩子，因?yàn)槟憬o我的沒(méi)有人能再給我。
31、分開(kāi)的一分一秒使我明白，男人的心也是玻璃做的；想你的每時(shí)每刻讓我懂得，我的心也需要愛(ài)的撫慰。
32、一份不渝的友誼，執(zhí)著千萬(wàn)個(gè)祝福，給我想念的朋友，溫馨地問(wèn)候。
33、打開(kāi)你的手機(jī)，收到我的祝福，忘掉所有煩惱，你會(huì)幸福每秒，對(duì)著鏡子笑笑，從此開(kāi)心到老，想想明天美好，相信自己最好。
34、我再怎樣忙，也不克不及遺忘伴侶之間的蜜意！祝你夏天清冷，心似藍(lán)天，把戲漂亮，終身幸福！
35、每一段記憶，都有一個(gè)密碼。只要時(shí)間，地點(diǎn)，人物組合正確，無(wú)論塵封多久，那人那景都將在遺忘中重新拾起。()你也許會(huì)說(shuō)“不是都過(guò)去了嗎？”其實(shí)過(guò)去的只是時(shí)間，你依然逃不出，想起了就微笑或悲傷的宿命，那種宿命本叫“無(wú)能為力”。
36、我愿做一棵樹，屹立在你必經(jīng)的路上。我愿做一片云，替你抵擋烈日。我愿做一把傘，經(jīng)受暴風(fēng)驟雨。這就是愛(ài)情！
37、想跟你說(shuō)：朋友是會(huì)默默在身邊支持你的，如果遇到了不順心的事情就回頭看看，你會(huì)發(fā)現(xiàn)還有我從始至終都在陪伴著你?？鞓?lè)起來(lái)吧！
38、朋友，既然為友人，那我們就要風(fēng)雨同舟，一同向前，共同進(jìn)步，為我們的夢(mèng)想奮斗吧！堅(jiān)信，我們會(huì)有雨過(guò)天晴的那一天。朋友，你的傷，即是我的痛，讓我與你分擔(dān)你的苦；我的樂(lè)，亦是你的笑，讓我們共同分享我們的快樂(lè)。作到同甘共苦。
39、這一輩子，我需要的不多，一碗飯一杯茶而已，但是我希望飯是你做的，茶是你泡的。
40、初遇你的心情是溫馨的，和你交友的時(shí)候是真心的，與你在一起的時(shí)候是開(kāi)心的，認(rèn)識(shí)你這個(gè)朋友是無(wú)怨無(wú)悔的。
41、好聽(tīng)的故事沒(méi)有結(jié)局，真摯的友誼不用言語(yǔ)，惦念的朋友才有短信，祝福的電波不會(huì)休息，美好的向往沒(méi)有距離，問(wèn)候的短信表達(dá)心意！
42、你固然會(huì)失去一切，但你永遠(yuǎn)都不會(huì)失去我。我不愿離開(kāi)你，也永遠(yuǎn)都不會(huì)離開(kāi)你。倘若有一天我們分開(kāi)了，那么彩虹天堂的那端，我們?cè)僖?jiàn)……
43、魅力是什么？魅力不是漂亮，漂亮的女人不一定能吸引我，端莊幽雅的女人我才喜歡。所以你不用擔(dān)心自己不夠漂亮。
44、愛(ài)是一種感受，即使痛苦也會(huì)覺(jué)得幸福；愛(ài)是一種體會(huì)，即使心碎也會(huì)覺(jué)得甜蜜；愛(ài)是一種經(jīng)歷，即使破碎也會(huì)覺(jué)得美麗。
45、你的懷抱是我的避風(fēng)港，你的眼神是我的堅(jiān)持的信念，你的好是別人無(wú)法比擬的！我想告訴你：我們的愛(ài)，是世界上最幸福的愛(ài)。
46、美麗的彩虹在雨后，真心的想念在別后，好運(yùn)好夢(mèng)好心情在你收到短信后，親愛(ài)的朋友，真心希望這一刻，幸福美妙就在你身旁。
47、天，因?yàn)橛辛岁?yáng)光，所以很藍(lán)；地，因?yàn)橛辛舜河?，所以很綠；海，因?yàn)橛辛孙L(fēng)兒，所以很寬；心，因?yàn)橛辛四悖院苊溃?/p>
48、你孤獨(dú)時(shí)，風(fēng)兒就是我的歌聲，愿它能使你得到片刻的安慰；當(dāng)你驕傲?xí)r，雨點(diǎn)就是我的警鐘，愿它能使你獲得永恒的謙遜。
49、我以為小鳥飛不過(guò)滄海，是小鳥沒(méi)有飛過(guò)滄海的勇氣，十年后我才發(fā)現(xiàn)，不是小鳥飛不過(guò)去，而是滄海的那一頭，早已沒(méi)了等待…
50、朋友，你是我生命中的一首詩(shī)，朋友，你是我?jiàn)^進(jìn)的原動(dòng)力。沒(méi)有你的日子里，我不知道是怎樣熬過(guò)十個(gè)春夏秋冬，而有你的二十多天里；我的生活是如此的快樂(lè)。
51、我不知道如何才能表達(dá)我對(duì)你的那分情，我只知道沒(méi)有你我會(huì)憔悴到死，就象那朵凋謝的玫瑰一樣，失去靈魂！
52、手機(jī)都有轉(zhuǎn)移功能，你也發(fā)揮一下轉(zhuǎn)移嘛，把不快，不如意都轉(zhuǎn)移掉，實(shí)在不行你就轉(zhuǎn)移給我吧，我希望看到快樂(lè)的你，那就我最大的心愿。
53、朋友，本是知情、知己、友情人，一天不見(jiàn)非常想念，兩天不見(jiàn)非常掛念，幾天不見(jiàn)非常懷念，祝你新年財(cái)運(yùn)亨通，吉祥如意！
感人肺腑范文第2篇
德陽(yáng)市東汽中學(xué)教師譚千秋的遺體在廢墟中找到時(shí)，是“雙臂張開(kāi)趴在課桌上”的，身下死死護(hù)著4名學(xué)生，他和死神做了一個(gè)以一換四的“交易”?！按盒Q到死絲方盡，蠟炬成灰淚始干！”這位中學(xué)老師在地震開(kāi)始的幾秒鐘內(nèi)意識(shí)到“大地在發(fā)怒”，他迅速指揮學(xué)生下樓到安全的地方，在房屋快倒塌的一瞬間，他一個(gè)平凡的“雄鷹展翅”護(hù)住了四名學(xué)生，他以自己的行動(dòng)最生動(dòng)地詮釋了“老師”的真義。
老師，我淚流滿面！老師，我深致敬意！在自然的威力面前，老師，您的軀體同樣柔弱，但您卻在極端的條件下構(gòu)筑了生命的空間。在廢墟的現(xiàn)場(chǎng)，您留給我們的最后姿態(tài)是生命對(duì)生命最有力的掩護(hù)。您與世界訣別的那一刻，卻是給我們所有人上的最后也是最震撼的一課。老師，謝謝您！
當(dāng)我看到這張照片的時(shí)候，我哽咽了，心里有一種無(wú)法用語(yǔ)言來(lái)形容的感動(dòng)。讓我們一同來(lái)接受一次心靈的洗滌吧！
感人肺腑范文第3篇
“二十年后來(lái)相會(huì)”發(fā)言稿這么多天了，我一直在問(wèn)自己：是什么能有這么大的凝聚力？能讓全班的同學(xué)從世界各地齊聚重慶。是組織者的號(hào)召力？化學(xué)班的凝聚力？重慶大學(xué)的召喚力？還是美麗山城的吸引力？不！是緣分，是你我間那份同學(xué)的情誼，是我們?cè)?jīng)一起度過(guò)的青春歲月烙在你我心中的那深深的印跡，在召喚著你我，來(lái)履行我們青春的約定（音樂(lè)）！二十年沒(méi)見(jiàn)了！同學(xué)們。多少次，我在腦海里猜想過(guò)你的模樣，多少次，我在夢(mèng)鄉(xiāng)里幻聽(tīng)過(guò)你的聲音。但，直到今天，直到見(jiàn)到大家，那模糊的記憶才逐漸清晰，你的音容笑貌才撥開(kāi)虛幻的面紗，真實(shí)地展現(xiàn)在我的眼前。鄉(xiāng)音未改風(fēng)度添，紅顏褪去鶴發(fā)染，瞇眼相識(shí)不相認(rèn)，定睛看去仍青年。憑心而論，人一生中真正難以忘懷的日子不多。
但是，我相信，今天—對(duì)于在座的每一位同學(xué)來(lái)說(shuō)，都將是終身難忘的！同學(xué)們，還記得這首歌嗎？為了它，我們從海內(nèi)外趕來(lái)重逢，在今天這個(gè)難忘的日子里，除了相互傾訴離別之苦、重逢之喜外，留在我們心中更多的則是對(duì)青春年華的追憶，是對(duì)已逝歲月的感慨。毋庸質(zhì)疑，大學(xué)生活是人生的精華，值得慶幸的是，我們?cè)谧拿恳晃欢枷嘧R(shí)在那精華的歲月里！還記得嗎？球場(chǎng)上他矯健的身影，教室里你專注的神情，班級(jí)舞會(huì)上她緬甸的眼神、優(yōu)美的舞姿，廁所中冬日晚傳出的沖涼的嚎叫，半夜里翻墻回寢室的他淅嗦的腳步聲，百米考試時(shí)我故意前挪的起跑線……還記得嗎？民主湖那并不太清的湖水，也不夠高的假山；女生宿舍那男生向往但又不能自由進(jìn)出的禁地；華巖水庫(kù)，我們一起暢飲的綠豆燒白酒；大足石刻，你我曾經(jīng)小歇的綠地斜坡……。哦，太多了，記憶的潮水快要淹過(guò)我的頭頂，我都快喘不過(guò)氣來(lái)了。
我們大家20歲相識(shí)，20年后的今天又重逢在一起。這樣的加法做不了幾次呀，我的同學(xué)們！讓我們?cè)诨貞涍^(guò)去的時(shí)候，更加珍惜今天，更加注重未來(lái)吧，我相信，這次聚會(huì)定會(huì)使這份沉顛顛友情延向你我的有生之年，甚至將它通過(guò)我們后代延向更遠(yuǎn)的未來(lái)。俗話說(shuō)：失去的東西你才知道珍惜。為什么要等到失去以后呢？我呼吁：把握住今天吧，把握住我們已有的這份珍貴友誼吧，在我們的有生之年一起分享歡樂(lè)與憂愁，一起促成一些我們想做、但又單靠自己做不了的事情……
感人肺腑范文第4篇
2、新年祝福語(yǔ)：當(dāng)你看見(jiàn)這信息時(shí)，幸運(yùn)已降臨到你頭上，財(cái)神已進(jìn)了你家門，榮華富貴已離你不遠(yuǎn)。祝福你新年快樂(lè)!
3、新年祝福語(yǔ)：新年又至送去大衣一件，用它裹住溫情，懷揣浪漫的愛(ài)情，兜滿幸福的友情，扣緊身體健康，阻隔厄運(yùn)，每天都有好心情!
4、新年祝福語(yǔ)：新年誰(shuí)最紅?速度趕超劉翔，挺拔有如姚明，英俊蓋過(guò)田亮，富?？购馕淦?，女友靚過(guò)晶晶.還有誰(shuí)，就是看短信的你呀!
5、新年祝福語(yǔ)：我的祝福跨過(guò)重重高山，掠過(guò)條條小溪，跳過(guò)大馬路，竄過(guò)小胡同，閃過(guò)賣冰糖葫蘆的老太太，鉆進(jìn)你耳朵里-新年快樂(lè)!
6、新年祝福語(yǔ)：一片綠葉，飽含著它對(duì)根的情誼;一句賀詞，濃縮了我對(duì)你的祝愿。又是一個(gè)美好的開(kāi)始--新年歲首，祝成功和快樂(lè)永遠(yuǎn)伴隨著你。
7、新年祝福語(yǔ)：遠(yuǎn)方的你是否無(wú)恙?在遙遠(yuǎn)的思念里，改變的是我的容顏，不變的是永遠(yuǎn)愛(ài)你的心!真心愿你新年快樂(lè)!
8、新年祝福語(yǔ)：你在新年夜被通緝了，你的罪行是：1.對(duì)朋友太好，又夠義氣;2.青春的面孔，燦爛的笑容。本庭現(xiàn)判決罰你終身做我的朋友，不得上訴!
9、新年祝福語(yǔ)：金錢是一種有用的東西，但是只有在你覺(jué)得知足的時(shí)候，它才會(huì)帶給你快樂(lè)。所以你應(yīng)該把多余的錢交給我，這樣我們兩個(gè)都會(huì)感到快樂(lè)了!
10、新年祝福語(yǔ)：今年過(guò)節(jié)不收禮，其實(shí)給點(diǎn)也可以。十塊八塊不嫌棄，十萬(wàn)八萬(wàn)過(guò)得去.你要真是沒(méi)的送，短信一條也可以。新年快樂(lè)!
11、新年祝福語(yǔ)：一直很想跟你說(shuō)，但不知你會(huì)不會(huì)覺(jué)得我太心急。我又怕被別人搶先一步，所以我決定鼓起勇氣告訴你：新年快樂(lè)!
12、新年祝福語(yǔ)：祝您在新年的假期里：小酒喝到六親不認(rèn)，香煙抽到同歸于盡，麻將搓到晝夜不分，跳舞跳到筋疲力盡，吹牛吹到自己不信。
13、新年祝福語(yǔ)：聽(tīng)說(shuō)過(guò)年你要到我們家做客，我弟弟會(huì)代我去接你，為便于確認(rèn)身份，請(qǐng)你左手拿兩條上等煙，右手提兩瓶茅臺(tái)酒。
14、新年祝福語(yǔ)：祝你正財(cái)、偏財(cái)、橫財(cái)，財(cái)源滾滾;親情、友情、私情，情情如意;官運(yùn)、財(cái)運(yùn)、桃花運(yùn)，運(yùn)運(yùn)亨通。
15、新年祝福語(yǔ)：酒越久越醇，朋友相交越久越真;水越流越清，世間滄桑越流越淡。祝新年快樂(lè)，時(shí)時(shí)好心情!
16、新年祝福語(yǔ)：對(duì)你的思念象裊裊的輕煙不絕如縷，對(duì)你的祝福是潺潺的小溪叮咚作響?；蛟S歲月將往事褪色，或許空間將彼此隔離。但值得珍惜的依然是你給我的情誼。再次對(duì)你說(shuō)聲：新年快樂(lè)!
17、新年祝福語(yǔ)：愿你抱著平安，擁著健康，揣著幸福，攜著快樂(lè)，摟著溫馨，帶著甜蜜，牽著財(cái)運(yùn)，拽著吉祥，邁入新年，快樂(lè)度過(guò)每一天!
18、新年祝福語(yǔ)：愿所有的好夢(mèng)依偎著你，入睡是甜，醒來(lái)成真!愿所有的財(cái)運(yùn)籠罩著你!日出遇貴，日落見(jiàn)財(cái)!愿所有的吉星呵護(hù)著你!時(shí)時(shí)吉祥!刻刻平安!
19、新年祝福語(yǔ)：送你一件外套，前面是平安，后面是幸福，吉祥是領(lǐng)子，如意是袖子，快樂(lè)是扣子，口袋里滿是溫暖，穿上吧，讓它相伴你的每一天!新年快樂(lè)!
20、新年祝福語(yǔ)：零時(shí)的鐘聲響徹天涯，新年的列車準(zhǔn)時(shí)出發(fā).它馱去難忘的歲月，迎來(lái)了又一輪火紅的年華.祝你新年快樂(lè)，鵬程萬(wàn)里!
21、新年祝福語(yǔ)：層層往事在歲月沉淀，留下無(wú)盡回憶，親情讓我感到幸福無(wú)限。謝謝爸媽給我生命，給我快樂(lè)，給了我又一個(gè)嶄新的一年。
22、新年祝福語(yǔ)：愛(ài)人，你在我記憶的畫屏上增添了許多美好的懷念，似錦如織!請(qǐng)接受我深深的祝愿吧，愿所有的歡樂(lè)永遠(yuǎn)伴隨你!新年快樂(lè)!
23、新年祝福語(yǔ)：相聚的日子都只為醞一杯濃酒，釀流動(dòng)相思，在新年的鞭炮聲中凝視你如此迷人的面龐，只想對(duì)你說(shuō)：愛(ài)你一萬(wàn)年!
24、新年祝福語(yǔ)：遠(yuǎn)方的你是否無(wú)恙?在遙遠(yuǎn)的思念里，改變的是我的容顏，不變的是永遠(yuǎn)愛(ài)你的心!愛(ài)人，真心愿你新年快樂(lè)!
25、新年祝福語(yǔ)：日出+日落=朝朝暮暮，月亮+星星=無(wú)限思念，風(fēng)花+雪月=柔情蜜意，流星+心語(yǔ)=祝福萬(wàn)千，祝你有個(gè)快樂(lè)的新年!
26、新年祝福語(yǔ)：我最親愛(ài)的朋友：在新年來(lái)臨之際，祝愿上帝保佑您!觀音菩薩護(hù)住您!財(cái)神抱住您!愛(ài)神射住您!食神吻住您!
27、新年祝福語(yǔ)：我把新世紀(jì)的祝福和希望，悄悄地放在將融的雪被下，讓它們沿著春天的秧苗生長(zhǎng)，送給你滿年的豐碩與芬芳!
感人肺腑范文第5篇
【關(guān)鍵詞】 人胚胎肺;間充質(zhì)干細(xì)胞; 放射性肺炎
放射性肺損傷是最為常見(jiàn)和嚴(yán)重的胸部放療并發(fā)癥之一，其高發(fā)病率限制了腫瘤的放療劑量，從而使腫瘤治療療效下降，部分重度放射性肺損傷明顯增加了患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)。因此積極尋找能夠預(yù)防、逆轉(zhuǎn)和治療放射性肺損傷并且副作用小的治療方法成為非常重要的課題。人們?cè)谠S多組織和器官中都發(fā)現(xiàn)和分離了具有多分化潛能的相應(yīng)干細(xì)胞，但在肺組織證實(shí)和分離肺干細(xì)胞的研究進(jìn)展緩慢，呼吸道黏膜上皮及肺泡上皮細(xì)胞終生不斷自我更新，尤其在肺組織嚴(yán)重?fù)p傷以后，上皮更新，促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)，在理論上肯定存在多能干細(xì)胞，人們用同位素標(biāo)記的方法取得了一些肺干細(xì)胞存在的證據(jù)，肺泡上皮Ⅱ型細(xì)胞中可能存在具有干細(xì)胞特征的細(xì)胞類型。本研究通過(guò)對(duì)人胚肺MSC分離、傳代培養(yǎng)、生物學(xué)特性及多向分化能力的測(cè)定，明確了人胚肺MSC的干細(xì)胞特性。通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及體外細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)，證實(shí)了人胚肺MSC能有效促進(jìn)肺泡上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，且能對(duì)放射性損傷后肺上皮細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)〔1，2〕。
1 材料與方法
1.1 MSC的分離和培養(yǎng) 選取15例水囊引產(chǎn)胎兒，胎齡為3～5個(gè)月。取胎兒肺臟，用DHanks液反復(fù)沖洗，剪成碎塊，用0.2% Ⅱ型膠原酶(Sigma)消化，37℃、30 min，過(guò)100目鋼網(wǎng)，制成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞密度為2×106/ml，用含DMEM/F12，MCDB201，2% FCS(Gibco BRL公司)培養(yǎng)液，置37℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，3 d后換液，棄去非貼壁的細(xì)胞，以后每3天半量換液。當(dāng)細(xì)胞達(dá)80%～90%融合時(shí)，0.25%胰酶(Sigma)常規(guī)消化傳代。
1.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及細(xì)胞周期的測(cè)定
1.2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察 取1～7代MSC，置于有小玻片的3.5cm直徑平皿中，37℃，飽和濕度，5% CO2培養(yǎng)12 d后取出，空氣風(fēng)干，瑞士染色，油鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。
1.2.2 細(xì)胞周期的測(cè)定 MSC細(xì)胞周期分析的主要試劑：RNA酶I(TaKaRa)，碘化丙啶(PI，Sigma)。將胎兒MSC消化，70%冷乙醇4℃固定30 min，PBS液洗滌細(xì)胞2遍，5 μg/ml I染色(室溫，5 min)，用流式細(xì)胞儀(FACSVantage型)檢測(cè)，Mod FIT軟件分析結(jié)果。用流式細(xì)胞儀測(cè)定第11、15代MSC的DNA含量，可見(jiàn)處于G0/G1期的細(xì)胞多，分別為95.34%、95.68%，S期少，分別為4.13%、3.58%。
1.3 免疫組化及PTPCR方法檢測(cè)人胚肺MSC向成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化能力
1.3.1 人胚肺MSC的一般生物學(xué)特性 單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)48～72 h后，在鏡下可見(jiàn)散在的貼壁細(xì)胞，呈典型紡錘樣成纖維細(xì)胞狀，7～10 d形成放射狀克隆，挑出20個(gè)克隆分別培養(yǎng)，約1 w形成致密的貼壁細(xì)胞層，細(xì)胞形態(tài)均一，生長(zhǎng)速度快，易被胰酶消化，可傳至17代以上，其形態(tài)及生長(zhǎng)特點(diǎn)不發(fā)生明顯改變。以下描述中將此類細(xì)胞稱為人胚肺貼壁細(xì)胞(fetal lungderived adherent cell，F(xiàn)LAC)，見(jiàn)圖1。
1.3.2 MSC多系誘導(dǎo)分化的鑒定 FLAC在成脂肪誘導(dǎo)體系中培養(yǎng)3 d，細(xì)胞由成纖維細(xì)胞樣逐漸收縮變短，成為立方形或多角形。連續(xù)培養(yǎng)7 d，鏡下可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)有微小脂滴出現(xiàn)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，脂滴逐漸增大融合。培養(yǎng)2 w時(shí)，可見(jiàn)融合成團(tuán)的脂滴充滿整個(gè)細(xì)胞，誘導(dǎo)2周期后用油紅O染色，可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的脂肪被特異的染成紅色，見(jiàn)圖2B。上述細(xì)胞同時(shí)表達(dá)脂肪細(xì)胞特異性的PPARγ2。成骨培養(yǎng)中細(xì)胞形態(tài)由原來(lái)的梭形變成了立方形，隨著細(xì)胞生長(zhǎng)密度的增長(zhǎng)形成多層的結(jié)節(jié)結(jié)構(gòu)，而對(duì)照中細(xì)胞仍是梭形且呈單層生長(zhǎng);80%～90%的細(xì)胞呈Apase陽(yáng)性，而對(duì)照中的Apase陽(yáng)性細(xì)胞較少;von Kossa染色發(fā)現(xiàn)在成骨培養(yǎng)有明顯的鈣化基質(zhì)沉積，而對(duì)照中未見(jiàn)到此現(xiàn)象;RTPCR分析表明MSC經(jīng)OS誘導(dǎo)分化培養(yǎng)后表達(dá)骨鈣蛋白基因，見(jiàn)圖2C。
1.4 放射性肺炎肺泡上皮細(xì)胞的培養(yǎng) 2BS細(xì)胞條件培養(yǎng)液的獲?。?1)條件培養(yǎng)基1的制備：2BS細(xì)胞培養(yǎng)至當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)融合達(dá)90%時(shí)，給予換液，24 h后無(wú)菌條件下取其上清，過(guò)濾細(xì)胞碎片后備用。(2)條件培養(yǎng)基2的制備：2BS細(xì)胞培養(yǎng)至當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)融合達(dá)90%時(shí)，給予換液，同時(shí)取C57BL/6小鼠全肺用6MVX線直線加速器進(jìn)行單次照射13 Gy后單個(gè)肺細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，24 h后取上清，過(guò)濾細(xì)胞碎片后備用。
1.5 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)體外測(cè)定人胚肺MSC修復(fù)放射損傷肺組織的能力，對(duì)比檢測(cè)實(shí)驗(yàn)及對(duì)照組TGFβ1的含量
1.5.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)環(huán)境 健康雌性 C57BL/6 小鼠40只，體重(200±20)g，由上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，飼養(yǎng)于SPF級(jí)大鼠飼養(yǎng)室，受試前籠養(yǎng)7 d以適應(yīng)環(huán)境。
1.5.2 試劑及儀器 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒，為博士德公司產(chǎn)品。SIEMENS PRIMUS KP2型直線加速器由德國(guó)西門子公司生產(chǎn)。
1.5.3 動(dòng)物分組 在照射前1 w將40只雌性，C57BL/6 小鼠，隨機(jī)分作隨機(jī)分為空白組、模型組、實(shí)驗(yàn)組1，實(shí)驗(yàn)組2，每組動(dòng)物均為10只。
1.5.4 模型建立及實(shí)驗(yàn)方法 空白組：不做任何處理;其余3組均用6MVX線直線加速器進(jìn)行全肺單次照射13 Gy;實(shí)驗(yàn)組1照射后每3日給予尾靜脈注射條件培養(yǎng)液1約0.3 ml;實(shí)驗(yàn)組2照射后每3日給予尾靜脈注射條件培養(yǎng)液2約0.3 ml。
1.5.5 標(biāo)本收集及處理 照射后4 w，每組各隨機(jī)取5只小鼠活體取材。腹腔注射2%戊巴比妥鈉0.12 ml/100 g，將大鼠麻醉后，分別取4 ml腹主動(dòng)脈血用ELISA方法檢測(cè)血清中TGFβ1的水平;將右上肺組織固定于10%緩沖性甲醛液中，常規(guī)制成石蠟切片備用，HE染色后光鏡觀察病理改變。
2 結(jié) 果
2.1 光鏡下觀察組織病理改變 與空白組小鼠比較，模型組小鼠的肺組織照射后存在明顯的病理組織學(xué)改變，早期以急性炎癥反應(yīng)為主，表現(xiàn)為肺充血、水腫、肺間質(zhì)增厚，見(jiàn)圖3A;實(shí)驗(yàn)組1的病理與單純照射組小鼠相似，存在明顯的炎癥反應(yīng)，肺充血、水腫明顯，且肺泡腔內(nèi)可見(jiàn)明顯滲出液，提示炎癥反應(yīng)較重，見(jiàn)圖3B。實(shí)驗(yàn)組2的病理表現(xiàn)則與正常組小鼠接近，炎癥反應(yīng)較輕，僅表現(xiàn)為輕度肺充血，見(jiàn)圖3C。
2.2 照射后各組大鼠血清TGFβ1水平 照射后4 w開(kāi)始，實(shí)驗(yàn)組1及模型組小鼠血清TGFβ1濃度明顯增高〔(30.25±6.33) ng/ml vs (16.95±2.47) ng/ml〕，實(shí)驗(yàn)組1尤為明顯(P
3 討 論
現(xiàn)階段研究表明，放射性肺炎所致的肺組織損傷不僅僅是單一靶細(xì)胞損傷的結(jié)果，而且是一個(gè)有多種細(xì)胞參與、有多種細(xì)胞因子調(diào)控的復(fù)雜過(guò)程〔3〕。放射線致使肺泡Ⅱ型細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞受損〔4〕，急性期表現(xiàn)為肺血管特別是毛細(xì)血管損傷，產(chǎn)生充血、水腫和細(xì)胞浸潤(rùn)，急性改變有可能自行消散，但常引起肺結(jié)締組織增生和纖維化。其中肺組織病理改變是反映肺炎程度的最直觀指標(biāo)，可判斷肺炎的程度，同時(shí)也可以篩選預(yù)防與治療的藥物?；A(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)，放射性肺損傷可引起肺內(nèi)效應(yīng)細(xì)胞即肺泡巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放多種細(xì)胞因子，介導(dǎo)炎性反應(yīng)，啟動(dòng)和促進(jìn)肺組織纖維化。其中TGFβ1較為重要，是諸多參與放射性肺損傷因子中頗受關(guān)注的細(xì)胞因子，能夠?qū)⑸镄?yīng)擴(kuò)大，參與放射性肺損傷的發(fā)生與發(fā)展〔4〕。
近年來(lái)，干細(xì)胞的研究引起了人們的極大關(guān)注，而成體干細(xì)胞的可塑性研究是干細(xì)胞研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一，其中發(fā)現(xiàn)最早并且研究最多的是骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)。BMSCs是來(lái)源于中胚層的一類多能干細(xì)胞，在不同誘導(dǎo)條件下具有向心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)元及肺泡上皮細(xì)胞等分化的多項(xiàng)潛能〔5～7〕。BMSCs可取自自體骨髓，取材方便且體外易于分離培養(yǎng)，對(duì)機(jī)體損傷小，免疫原性弱，組織相容性好，這為移植BMSCs替代治療受損組織提供了可能。
放射性肺炎與多種細(xì)胞、生長(zhǎng)因子的激活和相互作用有關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道〔8〕，小鼠肺部接受照射后1 d，肺組織中即可出現(xiàn)TGFβ基因和Ⅰ型膠原基因的表達(dá)增多;照射后14 d，其表達(dá)量為第1天的5倍。研究表明，發(fā)生放射性肺損傷患者的血清TGFβ1含量也持續(xù)升高〔9〕，提示血清TGFβ1可作為放射性肺損傷的預(yù)測(cè)因子，并且可通過(guò)降低血清TGFβ1濃度來(lái)減輕肺組織的損傷。本實(shí)驗(yàn)顯示，在照射后初期，小鼠血清TGFβ1濃度就顯著增高，而人胚肺MSC卻能使血清TGFβ1濃度持續(xù)下降，起到減輕放射性肺炎的作用。本研究發(fā)現(xiàn)放射性肺炎是在各種靶細(xì)胞和TGFβ1等細(xì)胞因子的共同作用下相互影響、相互調(diào)節(jié)的。人胚肺MSC可能通過(guò)下調(diào)TGFβ1的表達(dá)對(duì)急性放射性肺炎起到一定的防治作用，可為臨床提供有關(guān)放射性肺炎治療的新的生物治療方法。
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