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保密制度的意義

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保密制度的意義

保密制度的意義范文第1篇

【摘要】 【目的】 建立體外誘導(dǎo)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化的平滑肌細(xì)胞模型,探索骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化的平滑肌細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用。【方法】采用貼壁法從SD大鼠骨髓中分離骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(BMSC),運(yùn)用條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)BMSC分化成平滑肌細(xì)胞(SMC),采用免疫熒光法分析骨髓間質(zhì)干細(xì)胞及其分化后的細(xì)胞特異性標(biāo)志物。羥脯氨酸測(cè)定法檢測(cè)兩種細(xì)胞合成細(xì)胞外基質(zhì)能力,粘附和遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩種細(xì)胞的粘附和遷移能力。【結(jié)果】 ①分離的BMSC呈長(zhǎng)梭形,呈骨髓間質(zhì)干細(xì)胞表型。經(jīng)條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化15 d后,誘導(dǎo)分化的細(xì)胞形態(tài)呈梭形平滑肌樣。表達(dá)平滑肌細(xì)胞特異性蛋白標(biāo)志物α-肌動(dòng)蛋白(α-SMC)和平滑肌肌球蛋白重鏈1(SM-MHC1),呈平滑肌細(xì)胞表型,命名為骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化的平滑肌細(xì)胞(BMSC-SMC)。②羥脯氨酸測(cè)定結(jié)果顯示,未處理BMSC-SMC合成較高量的膠原,其合成量低于VSMC的合成量,經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理72 h后,BMSC-SMC合成膠原的能力顯著降低(P < 0.01)。③細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),未處理BMSC-SMC有中等數(shù)量的細(xì)胞發(fā)生粘附,經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理1 h后,BMSC-SMC細(xì)胞粘附的數(shù)目少量增加,但兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05);經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理24 h后,BMSC-SMC細(xì)胞遷移的數(shù)目顯著增多,與未處理BMSC-SMC比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)?!窘Y(jié)論】 ①經(jīng)條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)后,骨髓干細(xì)胞表達(dá)平滑肌特異性標(biāo)志物,SMα-SMC和SM-MHC1,提示骨髓干細(xì)胞能成功分化成平滑肌細(xì)胞。②骨髓干細(xì)胞誘導(dǎo)成平滑肌細(xì)胞后,具有血管平滑肌細(xì)胞的一些生物學(xué)特征,如增殖能力和分泌胞外基質(zhì)能力,同時(shí)保留了骨髓干細(xì)胞的一些生物學(xué)特征,如高遷移能力,為其在促動(dòng)脈粥樣硬化因素作用下,跨內(nèi)皮細(xì)胞層和增殖的平滑肌細(xì)胞層遷移創(chuàng)造了有利的條件。

【關(guān)鍵詞】 氧化型低密度脂蛋白; 骨髓間質(zhì)干細(xì)胞; 誘導(dǎo)分化; 血管平滑肌細(xì)胞

Abstract: 【Objective】 To establish the model of smooth muscle cell differentiated from bone mesenchymal stem cell (BMSC-SMC) in vitro and investigate the roles of BMSC-SMC in the occurrence and development of artherosclerosis (As). 【Methods】 BMSC was isolated from the femoral bone of SD rats by adherent method, and VSMC from thoracic aorta. BMSC-SMC was differentiated from BMSC by special condition medium. The specific markers of BMSC and smooth muscle cell differentiated from bone mesenchymal stem cell (BMSC-SMC) were identified by immunofluorescence (IF) staining. After treated with 80 mg/L ox-LDL for 72 h, hydroxyproline assay was performed to detect the extracellular matrix synthesis capacity, and adhesion and migration experiments were used to assay the adhesive and migratory capacity of BMSC-SMC and VSMC. 【Results】 ① The isolated BMSC present a slim-spindle appearance. The cells (BMSC-SMC) induced by condition medium containing b-FGF and TGF-β for 中膜血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)遷移到內(nèi)皮下層并異常增殖或凋亡是動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)形成的重要步驟,近年的研究發(fā)現(xiàn)[1]骨髓干細(xì)胞分化而來(lái)的平滑肌細(xì)胞參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展,但骨髓干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cell, BMSC)分化而來(lái)的平滑肌細(xì)胞在新生血管內(nèi)膜中究竟是修復(fù)血管,還是促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生,迄今為止,尚不清楚。本研究在體外誘導(dǎo)骨髓干細(xì)胞分化為平滑肌細(xì)胞簡(jiǎn)稱骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化的平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cell differentiated from bone mesenchymal stem cell, BMSC-SMC),并通過(guò)羥脯氨酸測(cè)定法檢測(cè)細(xì)胞合成細(xì)胞外基質(zhì)能力,粘附和遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的粘附和遷移能力,探討B(tài)MSC-SMC在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 材 料

胎牛血清、L-DMEM、胰蛋白酶均為美國(guó)GIBCO 公司產(chǎn)品;L-谷氨酰胺、油紅O、b-FGF、TGF-β均為美國(guó)Sigma 公司產(chǎn)品;羥脯氨酸測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建成生物研究所;其余試劑均為分析純;4 ~ 6周SD大鼠由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào):scxk(湘):2003-0003。

1.2 方 法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)

①大鼠BMSC分離、培養(yǎng)、純化:參照文獻(xiàn)[2,3]方法,取4 ~ 6周SD大鼠體質(zhì)量100 ~ 120 g,雌雄不限。斷頸處死大鼠,無(wú)菌條件下取出股骨、脛骨,并徹底清除附著其上的肌肉組織,去除股骨、脛骨兩端骨髓,顯露骨髓腔,用含有肝素(200 U/mL)的PBS沖出骨髓腔內(nèi)骨髓,1 000 r/min離心6 min,棄去上層脂肪和上清。收集細(xì)胞沉淀,使用含150 mL/L胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)液制成均勻的細(xì)胞混懸液,按照1 × 105/mL的密度接種至50 cm2培養(yǎng)瓶中,在37 ℃、體積分?jǐn)?shù)為5% CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng)。②大鼠血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng):參照本實(shí)驗(yàn)室方法,SD大鼠,雌雄不限,體質(zhì)量150 ~ 200 g,4 ~ 6周齡。腹腔麻醉后,無(wú)菌操作取出胸主動(dòng)脈段,置于含PBS液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開(kāi)血管,刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層,切成約1 mm寬的小條,浸泡在含血清的PBS液中,并將切好的小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37 ℃ 恒溫箱,2 h左右,加入含200 mL/L胎牛血清的H-DMEM培養(yǎng)液,待細(xì)胞鋪滿瓶底后0.25%胰蛋白酶進(jìn)行消化傳代,每2 ~ 3 d一次,即大鼠VSMC。

1.2.2 定向誘導(dǎo)BMSC向SMC分化

參照文獻(xiàn)[4]方法將含150 mL/L胎牛血清的H-DMEM中加入堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b-FGF,2.5 ng/mL)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β,5 ng/mL),孵育第4代MSC,每2 ~ 3 d一次。誘導(dǎo)15 d,待細(xì)胞鋪滿瓶底后,2.5 g/L胰蛋白酶進(jìn)行消化傳代。

1.2.3 免疫熒光檢測(cè)分化平滑肌細(xì)胞表明標(biāo)志物

細(xì)胞培養(yǎng)于預(yù)先放有無(wú)菌蓋玻片的6孔培養(yǎng)板,處理結(jié)束后,每種抗原檢測(cè)都分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。取生長(zhǎng)狀況良好的細(xì)胞用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3遍,20 g/L多聚甲醛4 ℃固定15 min,PBS洗3次,每次5 min,0.5% Triton X-100穿透10 min,PBS洗3次,每次5 min。30 mL/L山羊血清室溫下封閉1 h,1:100加入SMα-actin和SM-MHC1小鼠抗大鼠一抗工作液,室溫下孵育1 h,PBS洗3遍,每次5 min,1:500 加入CY3標(biāo)記二抗,室溫1 h,PBS洗3遍,每次5 min,封片劑封片,熒光顯微鏡下觀察,KAPPAImageBase 圖像系統(tǒng)成像。

1.2.4 氧化低密度脂蛋白的制備

參照文獻(xiàn)[5]的方法制備氧化低密度脂蛋白,正常人血漿低密度脂蛋白(密度1.040 ~ 1.063 mg/mL)采用序列超速離心法制備。將LDL置于PBS溶液中,4 ℃透析36 h,充分去除EDTA后,用含10 μmol/L CuSO4 的PBS溶液(pH7.2),37 ℃透析20 h,進(jìn)行氧化修飾。氧化修飾后的LDL(ox-LDL)置含100 μmol/L EDTA 的PBS中,4 ℃透析24 h,終止氧化。超濾除菌,BCA試劑定量蛋白,調(diào)蛋白濃度至1 g/L用于實(shí)驗(yàn)。

1.2.5 膠原含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ox-LDL對(duì)BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞膠原合成量的影響

BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞分別以1.0 × 105個(gè)/mL的密度種于6孔板,培養(yǎng)24 h后,再以無(wú)血清DMEM培養(yǎng)24 h,換成100 mL/L胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,將細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組分別用80 mg/L ox-LDL處理,對(duì)照組H-DMEM培養(yǎng),培養(yǎng)72 h后,分別以2.5 g/L胰蛋白酶消化細(xì)胞,分別收集和處理細(xì)胞,具體方法參照羥脯氨酸測(cè)定試劑盒,計(jì)算羥脯氨酸量。

1.2.6 細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ox-LDL對(duì)BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞粘附的影響

用無(wú)包被的6孔平底培養(yǎng)板和一定濃度的FN包被的6孔平底培養(yǎng)板,4 ℃靜置過(guò)夜,用含熱變性的牛血清白蛋白(BSA,1 mg/mL)的Tris緩沖鹽沖洗30 min。胰蛋白酶消化BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞后,將細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組分別用含80 mg/L ox-LDL的H-DMEM培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞密度為1.0 × 105個(gè)/mL的細(xì)胞懸液,對(duì)照組用H-DMEM培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞密度為1.0 × 105個(gè)/mL細(xì)胞懸液,每孔接種100 μL的細(xì)胞懸液, 37 ℃溫箱內(nèi)靜置1 h,未粘連的細(xì)胞可洗去,粘附的細(xì)胞用40 g/L的多聚甲醛固定,HE染色,用光學(xué)顯微鏡觀察粘附反應(yīng),按固定視野記5個(gè)高倍視野( × 100)的細(xì)胞數(shù),每次實(shí)驗(yàn)做3孔,取均值。

1.2.7 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ox-LDL對(duì)BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞遷移的影響

BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞用2.5 g/L胰蛋白酶消化平滑肌細(xì)胞,分別收集和計(jì)數(shù)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液;將細(xì)胞懸液按1.0 × 105個(gè)/mL的密度種于6孔板中。再加入含100 mL/L胎牛血清的DMEM,放入37 ℃和體積分?jǐn)?shù)5% CO2的孵箱中靜置培養(yǎng)48 h,換用無(wú)血清的DMEM培養(yǎng)基,培養(yǎng)24 h,使細(xì)胞同步化,去上清培養(yǎng)液,無(wú)菌PBS洗滌3次,用200 μL的無(wú)菌Tip頭沿6孔板中央迅速畫一直線,用PBS清洗3次,將孔分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組用含80 mg/L ox-LDL的H-DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞,對(duì)照組用H-DMEM培養(yǎng)液細(xì)胞,37 ℃溫箱內(nèi)靜置24 h,每組重復(fù)3次;分別于24 h后取出,相差顯微鏡下觀察,拍照。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用x ± s表示,用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,采用兩組間t檢驗(yàn)比較,P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 骨髓間質(zhì)干細(xì)胞源性SMC和血管SMC表型鑒定

用免疫熒光法檢測(cè)VSMC早、晚期標(biāo)志物SMα-actin和SM-MHC1[6]。結(jié)果表明,誘導(dǎo)的BMSC-SMC表達(dá)VSMC的早、晚期標(biāo)志物SMα-actin和SM-MHC1,在胞漿內(nèi)呈絲狀,細(xì)胞骨架樣分布,呈平滑肌細(xì)胞表型(圖1 B、D)。其表達(dá)情況與VSMC相似(圖1 A、C)。

2.2 骨髓間質(zhì)干細(xì)胞源性SMC和血管SMC細(xì)胞合成細(xì)胞外基質(zhì)能力

利用羥脯氨酸測(cè)定試劑盒,檢測(cè)細(xì)胞合成膠原的含量,其原理是,羥脯氨酸在膠原蛋白中占13.4%,在彈性蛋白中占極少量,其它蛋白中均不存在。羥脯氨酸在氧化劑的作用下所產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物與二甲氨基苯甲醛作用呈現(xiàn)紫紅色,根據(jù)其呈現(xiàn)的深淺可推算出其含量。檢測(cè)結(jié)果顯示,未處理BMSC-SMC合成較高量的膠原,而其合成量低于VSMC的合成量,經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理72 h后,BMSC-SMC合成膠原的能力顯著降低(P < 0.01),相同處理VSMC合成膠原的能力亦降低(P < 0.05,圖2)。

2.3 骨髓間質(zhì)干細(xì)胞源性SMC和血管SMC細(xì)胞粘附能力

細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),細(xì)胞培養(yǎng)1 h后,未處理BMSC-SMC有中等數(shù)量的細(xì)胞發(fā)生粘附(圖3C),經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理1 h后,BMSC-SMC細(xì)胞粘附的數(shù)目少量增加(圖3D),但兩者比較無(wú)顯著性差異(P > 0.05)。同時(shí)未處理VSMC亦有中等數(shù)量的細(xì)胞發(fā)生粘附(圖3A),經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理1 h后,細(xì)胞粘附的數(shù)目有所減少(圖3B),但兩者比較無(wú)顯著性差異(P > 0.05)。

2.4 骨髓間質(zhì)干細(xì)胞源性SMC和血管SMC細(xì)胞遷移能力

細(xì)胞損傷-修復(fù)實(shí)驗(yàn)是經(jīng)典的檢測(cè)細(xì)胞遷移能力的實(shí)驗(yàn),檢測(cè)發(fā)現(xiàn),損傷細(xì)胞24 h后,未處理BMSC-SMC有中等數(shù)量的細(xì)胞發(fā)生遷移,少量細(xì)胞遷移至劃痕的中線,經(jīng)80 mg/L ox-LDL處理24 h后,BMSC-SMC細(xì)胞遷移的數(shù)目顯著增多,許多細(xì)胞遷移至的劃痕的中線對(duì)面,與未處理BMSC-SMC比較,具有顯著性差異(P < 0.01,圖4B和D),相同處理VSMC的細(xì)胞數(shù)目和距離亦增強(qiáng)(P < 0.05,圖4F和H),但增強(qiáng)幅度較BMSC-SMC小[7]。

3 討 論

ox-LDL由低密度脂蛋白(LDL)在體內(nèi)氧化形成,它是AS發(fā)生、發(fā)展乃至不穩(wěn)定斑塊形成的關(guān)鍵因子[8],其在AS中的病理作用已公認(rèn)[9-10]。目前在體外研究中用的低密度脂蛋白大多是用超速離心法制備,所制備的LDL要求4 ℃避光保存,保存時(shí)間不超過(guò)3周,天然的低密度脂蛋白經(jīng)氧化修飾形成的脂蛋白,稱為ox-LDL,用過(guò)度金屬離子Cu2+、Fe2+等,在體外適宜條件下與LDL孵育一段時(shí)間后,能使LDL發(fā)生氧化變構(gòu),成為ox-LDL[11]。

VSMC從血管的中層向內(nèi)膜下遷移,并以自分泌、旁分泌的形式分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和血管活性物質(zhì)在高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、冠脈搭橋術(shù)及血管成形術(shù)后再狹窄等多種血管損傷性疾病的形成過(guò)程中起著重要的作用[12-13]。而細(xì)胞-細(xì)胞之間以及細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)之間的正常粘附是細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、遷移以及損傷修復(fù)的基礎(chǔ),并負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)的傳遞,也是心血管系統(tǒng)所有組成成分維持正常功能的前提條件,粘附功能的異常在心血管疾病發(fā)病機(jī)制中也起著關(guān)鍵的作用[14]。VSMC的增殖和遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)的重構(gòu)在AS的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[15-17]。VSMC 從動(dòng)脈血管中層到血管內(nèi)皮層的遷移,使血管功能異常。VSMC從內(nèi)膜基底層移行入內(nèi)膜層,導(dǎo)致內(nèi)膜增厚,形成纖維帽,最終形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊[18]。然后局部炎癥環(huán)境可以引起膠原酶的表達(dá),抑制蛋白水解酶抑制劑的表達(dá),從而使纖維帽變得薄弱易于破裂,進(jìn)而引發(fā)血栓的形成,VSMC增生、遷移的程度決定了預(yù)后。

BMSC能進(jìn)行自我更新,能夠分化成脂肪細(xì)胞、骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和肌細(xì)胞等不同的細(xì)胞[19-21]。局部的環(huán)境和細(xì)胞群體決定了其分化方向[22],在體外TGF-β可誘導(dǎo)BMSC分化為VSMC[6]。2002年,Sata[1]提出血液干細(xì)胞分化而來(lái)的平滑肌細(xì)胞參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。

在本研究中我們對(duì)BMSC-SMC和VSMC合成細(xì)胞外基質(zhì)能力、粘附能力以及遷移能力進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,經(jīng)ox-LDL處理后,BMSC-SMC及VSMC合成膠原的能力都顯著降低;但細(xì)胞粘附能力均無(wú)差別; BMSC-SMC及VSMC細(xì)胞遷移的數(shù)目均顯著增多,并且BMSC-SMC的增強(qiáng)幅度更大。上述結(jié)果提示,在ox-LDL的作用下,BMSC-SMC合成膠原能力的下降,可能與其遷移能力有關(guān),但與其粘附能力無(wú)關(guān),說(shuō)明BMSC細(xì)胞在向VSMC細(xì)胞分化的過(guò)程中,出現(xiàn)了一些與VSMC具有相似性細(xì)胞生物學(xué)特征,同時(shí)保留了其BMSC細(xì)胞的一些特征。而且BMSC-SMC的遷移能力較VSMC強(qiáng),為其在促動(dòng)脈粥樣硬化因素作用下,跨內(nèi)皮細(xì)胞層和增殖的平滑肌細(xì)胞層遷移創(chuàng)造了有利的條件。

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保密制度的意義范文第2篇

關(guān)鍵詞:荷葉水提物;氧化低密度脂蛋白;單核細(xì)胞趨化蛋白1;血管細(xì)胞黏附分子1

中圖分類號(hào):R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1673-7717(2011)04-0799-04

Water Extract of The Lotus Leaf Suppressed Expression of Monocyte Chemoattractant

Protein-1(MCP-1) and Vascular Cell Adhesion Molecule 1(VCAM-1) Induced By

Oxidized Low Density Lipoprotein (Ox-LDL) in Human Umbilical Vein Endothelial Cells

ZHANG She-bing, XU Xin, MA Shao-chun, TANG Liang-qiu, JIANG Zhi-ping,F(xiàn)AN Wen-mao,

CHEN Jin-feng,CHANG Guan-nan, YANG Li-jun

(Department of Cardiology, Yuebei People's Hospital, Shaoguan 512026,Guangdong,China)

收稿日期:2010-11-25

基金項(xiàng)目:廣東省“建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省”科研立項(xiàng)(2009066);韶關(guān)市科技信息局資助項(xiàng)目[韶科(衛(wèi))2009-01]

作者簡(jiǎn)介:張社兵(1971-),男,湖南郴州人,副主任醫(yī)師,醫(yī)學(xué)博士,研究方向:冠心病心律失常。

通訊作者:徐新(1956-),男,江蘇無(wú)錫人,教授,碩士研究生導(dǎo)師,碩士,研究方向:動(dòng)脈粥樣硬化。

Abstract:Objective:To investigate the expressions of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1) and vascular cell adhesion molecule 1(VCAM-1) induced by oxidized low-density lipoprotein(Ox-LDL) in human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) suppressed by water extract of the lotus leaf.Methods:HUVECs were cultured and treated with Ox-LDL of 3 different concentrations (25 microg/L, 50 microg/L, and 100 microg/L) for 24 hours. We determined mRNA expressions of MCP-1 and VCAM-1 by semi-quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) .Concentration of MCP-1 and VCAM-1 protein in medium was measured using the enzyme linked-immuno-sorbent assay (ELISA) method. Pretreated HUVECs with water extract of the lotus leaf 24 hours before adding Ox-LDL ,then cells were treated with Ox-LDL(50 microg/L) for 24 hours. mRNA expressions of MCP-1 and VCAM-1 were determined by semi-quantitative RT-PCR. Concentration of MCP-1 and VCAM-1 protein in medium was measured using the ELISA method.Results:Exposure of HUVECs to Ox-LDL (25 microg /L,50 microg /L and 100 microg /L respectively) resulted in upregulation of MCP-1 and VCAM-1,both mRNA and protein expressions, in a dose-dependent manner. Expressions of MCP-1 and VCAM-1 induced by Ox-LDL(50 microg /L) were significantly suppressed by water extract of the lotus leaf in a dose-dependent manner. Conclusions:our results suggest that Ox-LDL can induce expressions of MCP-1 and VCAM-1 in a dose-dependent manner in HUVECs, and this process can be suppressed by water extract of the lotus leaf.

Key words:water extract of the lotus leaf;oxidized low-density lipoprotein;monocyte chemoattractant protein-1;vascular cell adhesion molecule 1

氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,Ox-LDL)是動(dòng)脈粥樣硬化最明確的危險(xiǎn)因子之一,Ox-LDL可能通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子和趨化因子,募集單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮黏附,從而在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生中起重要作用。荷葉為睡蓮科植物蓮的葉,又名藕葉,種植于我國(guó)南方大部分省份,荷葉藥、食兩用,既往研究表明,荷葉中的生物活性物質(zhì)具有降脂、減肥、降血壓等多種作用【sup】[1-4]【/sup】。本研究旨在探討荷葉水提物能否抑制Ox-LDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)趨化因子和黏附分子。

1 材料與方法

荷葉水提物(由湘南學(xué)院關(guān)章順教授提供),提取方法按文獻(xiàn)【sup】[11]【/sup】,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞[ATCC, USA.(CRL-1730)],新生小牛血清(中南大學(xué)湘雅中心實(shí)驗(yàn)室),RPMI 1640培養(yǎng)基(GIBCO),Ox-LDL(北京協(xié)和三友公司),Trizol(Molecular Research Center, Inc),RevertAid【sup】TM【/sup】 First strand Cdna Synthesis Kit(Fermentas),臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞存活率檢測(cè)試劑盒(江蘇碧云天生物技術(shù)研究所),TaKaRa Taq【sup】TM【/sup】 Hot start version[寶生物工程(大連)有限公司],DNA Ladder Marker[寶生物工程(大連)有限公司],引物設(shè)計(jì)與合成(北京奧科生物技術(shù)有限責(zé)任公司),MCP-1和VCAM-I ELISA試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)

1.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(human umbilical vascular endothelial cells,HUVECs)用含10%小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)基(含10mmol/L的HEPES,2mmol/L谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氫鈉,10%小牛血清),37℃、5%CO【sub】2【/sub】培養(yǎng)箱中培養(yǎng),隔天換液,生長(zhǎng)至85%融合時(shí)接種于6孔板,接種密度為1×10【sup】6【/sup】/孔。臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞活力大于90%。待細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)占孔板底面積約50%滿后,隨機(jī)分組用于實(shí)驗(yàn),每組重復(fù)3孔。

1.2 Ox-LDL刺激和藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn) Ox-LDL刺激組為細(xì)胞中分別加入25mg/L、50mg/L、100mg/L的Ox-LDL,共同孵育24h,藥物干預(yù)組則分別在細(xì)胞中加入10mg/L、20mg/L、40mg/L的荷葉水提物(用含DMSO的無(wú)血清培養(yǎng)基配制,DMSO含量<1‰)共同孵育24h,去上清,分別再加50mg/L的Ox-LDL刺激24h,收集細(xì)胞用于提取總RNA,空白對(duì)照組細(xì)胞中除不加Ox-LDL和藥物外其余條件同刺激組。

1.3 半定量RT-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞的單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和血管細(xì)胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)的mRNA的表達(dá):收集細(xì)胞,用Trizol提取細(xì)胞總RNA,經(jīng)紫外分光光度儀(Beckman DU-640)測(cè)定OD 260/280比值在1.8-2.0,半定量RT-PCR檢測(cè)MCP-1和VCAM-1的mRNA表達(dá),RT-PCR操作按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。RT反應(yīng)條件:70℃ 5min,25℃ 5min,25℃ 10min,42℃ 60min,70℃ 10min。人MCP-1引物:上游引物5’-CAT AGC AGC CAC CTT CAT TCC-3’,下游引物:5’-GAG TTT GGG TTT GCT TGT CCA-3’,PCR擴(kuò)增片段長(zhǎng)254 bp。人VCAM-1引物序列:上游:5’-TCT ACG CTG ACA ATG AAT CC-3’,下游:5’-ACT TGA CTG TGA TCG GCT TC-3’,擴(kuò)增長(zhǎng)度178bp;GAPDH引物序列:上游:5’-TCGGAGTCAACGGATTTGGTCGTA-3’,下游:5’-ATGGACTGTGGTCATGAGTCCTTC-3’,擴(kuò)增長(zhǎng)度521bp。引物由北京奧科生物技術(shù)有限責(zé)任公司合成。MCP-1反應(yīng)條件:94℃變性30秒、55℃退火30秒、72℃延伸60秒,30個(gè)循環(huán);最后72℃延伸7min。VCAM-1反應(yīng)條件:94℃ 5min,(94℃ 40s,59℃ 40s,72℃ 40s)30個(gè)循環(huán),然后72℃ 5min。PCR產(chǎn)物用2%瓊脂糖凝膠電泳,以MCP-1和VCAM-1擴(kuò)增條帶的吸光度值(A value)與GAPDH條帶的吸光度之比作為MCP-1和VCAM-1 mRNA的表達(dá)量。

1.4 酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme Linked-Immuno-Sorbent Assay,ELISA)測(cè)定細(xì)胞上清MCP-1和VCAM-1含量 采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定細(xì)胞上清中MCP-1和VCAM-1的蛋白水平,檢測(cè)靈敏度為15.6-1000pg/mL,操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒及酶標(biāo)儀的說(shuō)明書進(jìn)行。批內(nèi)批間變異系數(shù)均控制

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,多個(gè)樣本均數(shù)比較用One-Way ANOVA,兩兩比較用LSD法,P

2 結(jié) 果

2.1 不同濃度Ox-LDL刺激后HUVECs的MCP-1 mRNA和VCAM-1 mRNA的表達(dá)及細(xì)胞上清MCP-1和VCAM-1含量變化

如圖1、2、3所示,分別用25 mg/L、50 mg/L和100 mg/L的Ox-LDL刺激HUVECs后,MCP-1和VCAM-1 mRNA的表達(dá)及細(xì)胞上清中的含量呈濃度依賴性上調(diào)(P

2.2 荷葉水提物干預(yù)后MCP-1 mRNA和VCAM-1 mRNA的表達(dá)及細(xì)胞上清MCP-1和VCAM-1含量變化

如圖4、5、6示,荷葉水提物干預(yù)后,HUVECs的MCP-1 mRNA和VCAM-1 mRNA的表達(dá)及細(xì)胞上清MCP-1和VCAM-1含量呈濃度依賴性下降。

3 討 論

在動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,循環(huán)單核細(xì)胞趨化、聚集、黏附到血管內(nèi)皮是AS的最早期事件,其繼而浸入到血管內(nèi)皮下,參與血管壁的炎癥反應(yīng)和泡沫細(xì)胞的形成【sup】[5]【/sup】。由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的趨化因子和黏附分子在介導(dǎo)循環(huán)單核細(xì)胞趨化、聚集、黏附到血管內(nèi)皮的過(guò)程中起了至關(guān)重要的作用。既往研究表明MCP-1和VCAM-I參與了動(dòng)脈粥樣硬化形成,其作用在于趨化單核細(xì)胞向內(nèi)皮募集,促進(jìn)清道夫受體的表達(dá),誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的增殖和移動(dòng)等【sup】[6-8]【/sup】。

保密制度的意義范文第3篇

一、加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo),深入學(xué)習(xí)領(lǐng)會(huì)

及時(shí)召開(kāi)全局干部職工大會(huì)對(duì)新修訂的《保密法》進(jìn)行學(xué)習(xí),深刻了解保密法修訂的時(shí)代背景、主要思路和重要意義,特別是對(duì)新修訂的部分進(jìn)行了全面、系統(tǒng)的剖析和闡述。要求局機(jī)關(guān)各科室、各直屬單位根據(jù)自身特點(diǎn),有針對(duì)性學(xué)習(xí)和運(yùn)用保密法相關(guān)知識(shí),全局干部職工保密法制觀念、意識(shí)得到極大的增強(qiáng)。

進(jìn)一步完善局保密工作領(lǐng)導(dǎo)小組,領(lǐng)導(dǎo)組下設(shè)辦公室,負(fù)責(zé)保密工作的日常事務(wù)。領(lǐng)導(dǎo)小組定期不定期對(duì)全局的保密工作進(jìn)行檢查、督促和指導(dǎo),確保各項(xiàng)保密工作措施得到較好落實(shí),保密工作做到事事有人管,件件有人抓,責(zé)任具體,任務(wù)明確,措施得力。

二、健全完善保密管理工作制度

在抓好保密法制宣傳教育的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步健全完善干部、保密要害部門部位工作人員崗位職責(zé),進(jìn)一步規(guī)范會(huì)議保密制度、文件管理制度、電子傳輸保密制度等,建立并形成機(jī)關(guān)事務(wù)保密安全管理工作科學(xué)化、規(guī)范化、制度化的長(zhǎng)效機(jī)制。

三、加強(qiáng)教育,強(qiáng)化意識(shí),促進(jìn)檢查

為切實(shí)做好保密工作重要性的宣傳教育,局機(jī)關(guān)在局辦公會(huì)議上宣傳保密知識(shí)和保密案例、在局務(wù)會(huì)上傳達(dá)學(xué)習(xí)有關(guān)保密工作要求,還為局機(jī)關(guān)、各直屬單位發(fā)放《保密手冊(cè)》。

保密制度的意義范文第4篇

關(guān)鍵詞 競(jìng)爭(zhēng)情報(bào) 競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng) CIO管理 反情報(bào)活動(dòng)

競(jìng)爭(zhēng)是現(xiàn)代市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的本質(zhì)表現(xiàn),市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)條件下,企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)日益激烈,企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)是經(jīng)濟(jì)競(jìng)爭(zhēng)的主流,現(xiàn)代企業(yè)的成長(zhǎng)離不開(kāi)競(jìng)爭(zhēng)情報(bào),企業(yè)要在競(jìng)爭(zhēng)上取得優(yōu)勢(shì),就必須明確認(rèn)識(shí)和發(fā)揮競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)對(duì)企業(yè)的作用。企業(yè)只有依靠競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)才能不斷更新企業(yè)面貌,提高企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益,增強(qiáng)企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)能力,才能更好地滿足社會(huì)的需求,適應(yīng)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和激烈競(jìng)爭(zhēng)的要求。

1 競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)的整體作用競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)(Competitive Intelligence)具有企業(yè)決策的智囊作用,市場(chǎng)導(dǎo)向的尖兵作用,商品營(yíng)銷的警示作用,技術(shù)交流協(xié)作的參謀作用,市場(chǎng)投資經(jīng)濟(jì)價(jià)值的揭示作用,是現(xiàn)代企業(yè)生存的重要基礎(chǔ)和戰(zhàn)略武器。競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)的基本作用就是增強(qiáng)世界的有序性,對(duì)現(xiàn)代企業(yè)來(lái)講,競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)是企業(yè)生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)有序的保證、管理有序的基礎(chǔ)、決策有序的依據(jù)、控制有序的靈魂。競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)比一般的經(jīng)濟(jì)情報(bào)更加具有目的性、時(shí)效性、實(shí)用性。首先,它是企業(yè)感知外部環(huán)境變化的預(yù)警系統(tǒng),能幫助企業(yè)及時(shí)洞悉政治的、經(jīng)濟(jì)的、社會(huì)的、市場(chǎng)的變化以及這些變化對(duì)企業(yè)可能構(gòu)成的威脅和機(jī)遇。其次,它是企業(yè)為適應(yīng)未知環(huán)境變化而作出戰(zhàn)略決策和競(jìng)爭(zhēng)策略的支持系統(tǒng),為企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)決策提供依據(jù)和論證。第三,它是現(xiàn)代企業(yè)經(jīng)營(yíng)管理的智囊團(tuán)和思想庫(kù),是企業(yè)領(lǐng)導(dǎo)集團(tuán)的重要參謀。

2 競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)的管理工作競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)的管理工作包括對(duì)情報(bào)的管理和情報(bào)人員的管理工作。要使競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)最有效的為企業(yè)發(fā)揮作用,必須是收集、分析、服務(wù)反饋、管理決策各環(huán)節(jié)緊密配合。對(duì)競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)的管理是從情報(bào)的收集、分析研究、利用與決策開(kāi)始。競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)收集人員通過(guò)各種渠道收集到情報(bào)后,立即傳送給研究部門進(jìn)行分析,做到情報(bào)的進(jìn)一步精化,由表及里、由此及彼、去粗取精、去偽存真,提煉出高價(jià)值、智能化的情報(bào),供決策層及相關(guān)部門應(yīng)用,讓其在最短的時(shí)間內(nèi)作出好的戰(zhàn)略決策,以此來(lái)贏得市場(chǎng)與競(jìng)爭(zhēng)。尤其是對(duì)競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的企業(yè)實(shí)力、未來(lái)目標(biāo)、現(xiàn)行戰(zhàn)略進(jìn)行仔細(xì)分析,了解本企業(yè)在市場(chǎng)中的地位,作出搶占市場(chǎng)前的準(zhǔn)備。通過(guò)分析后的情報(bào)是智能性、增值性的產(chǎn)品,它由CIO(Chief Information Officer:信息經(jīng)理)反饋給各部門主管及決策層,從而采取及時(shí)有效的措施,贏得競(jìng)爭(zhēng),企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)才算發(fā)揮了作用。

當(dāng)今有很多企業(yè)是建而不用。所謂“建而不用”即跟著風(fēng)潮建立相應(yīng)的競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng),卻不會(huì)去應(yīng)用它,這是企業(yè)的重大失誤。這不僅是企業(yè)人員與資金的浪費(fèi),也使企業(yè)失去很多良好的機(jī)遇,企業(yè)也因此可能走向衰落。

人是關(guān)鍵性因素。對(duì)情報(bào)人員的管理尤為重要。首先要保證其素質(zhì)與技術(shù)水平,情報(bào)人員要學(xué)會(huì)如何快速、廣泛地收集情報(bào),無(wú)論是從書籍、報(bào)刊、產(chǎn)品目錄等收集,還是從第三方獲得情報(bào),都需有細(xì)致、全面、認(rèn)真的態(tài)度,還要保證了解計(jì)算機(jī)現(xiàn)代技術(shù),擁有很好的人際圈子,爭(zhēng)分奪秒的意識(shí),做到以上這些,才能收集到情報(bào)。情報(bào)人員還需對(duì)情報(bào)有分析研究的能力,要有一定的邏輯思維與市場(chǎng)分析能力,善于抓住事物的本質(zhì),做好系統(tǒng)分析,形成規(guī)范化、條理化的情報(bào)送交CIO,再由CIO發(fā)送給決策部門處理利用。情報(bào)人員還需要有很強(qiáng)的保密意識(shí),對(duì)情報(bào)系統(tǒng)的任何資料都需妥善保管,以免被其他公司竊取利用,對(duì)本公司造成不利和損失。設(shè)想如果情報(bào)人員都不能做到“不該說(shuō)的一句都不說(shuō)”,那么,公司的競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)必定是個(gè)失敗的部門,也就沒(méi)有任何存在的意義。

CIO的素質(zhì)是情報(bào)系統(tǒng)的決定性因素。首先,CIO要有領(lǐng)導(dǎo)藝術(shù),如果他在系統(tǒng)中能有高超的領(lǐng)導(dǎo)才能,獨(dú)特的領(lǐng)導(dǎo)藝術(shù)魅力,這個(gè)系統(tǒng)就有了好的首領(lǐng)。CIO必須是一個(gè)卓越的管理專家。對(duì)企業(yè)綜合、復(fù)雜的情報(bào)系統(tǒng)進(jìn)行全面有效的管理、開(kāi)發(fā)和利用,建立多方位多功能的情報(bào)體系,最大限度地實(shí)現(xiàn)情報(bào)資源的共享,以輔助公司高層決策和長(zhǎng)遠(yuǎn)規(guī)劃。CIO還必須有戰(zhàn)略遠(yuǎn)見(jiàn)。CIO能否及時(shí)獲取和處理與本公司經(jīng)營(yíng)活動(dòng)有關(guān)的最新情報(bào),幫助公司確立新的戰(zhàn)略方向和經(jīng)營(yíng)策略往往就成為企業(yè)能否立于不敗之地的關(guān)鍵所在。協(xié)調(diào)能力也是必不可少的。CIO一方面直接對(duì)最高決策者CEO(Chief Enterprise Officer)負(fù)責(zé),另一方面還要全面統(tǒng)籌調(diào)控情報(bào)系統(tǒng)各分支機(jī)構(gòu)和部門。商業(yè)經(jīng)營(yíng)頭腦是CIO的基礎(chǔ)。有著管理IS和公司商業(yè)部門的雙重經(jīng)驗(yàn),擁有卓越的領(lǐng)導(dǎo)才能和靈活的商業(yè)經(jīng)營(yíng)頭腦的高級(jí)復(fù)合型人才,他們通過(guò)對(duì)財(cái)務(wù)報(bào)表、管理報(bào)告和用戶信息數(shù)據(jù)的分析和集成,開(kāi)發(fā)出具有新活力的信息,并直接應(yīng)用到企業(yè)的經(jīng)營(yíng)決策中,從而極大地加快了企業(yè)在市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中的反應(yīng)能力。所以在建立企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)之前,選擇優(yōu)秀的CIO是首要管理工作。企業(yè)董事會(huì)還應(yīng)時(shí)刻監(jiān)督管理CIO的工作,保證了CIO的工作,情報(bào)工作即做對(duì)了一半。

另外,企業(yè)還應(yīng)對(duì)情報(bào)人員也實(shí)行相應(yīng)的獎(jiǎng)懲措施。其收集到的情報(bào)如果給企業(yè)創(chuàng)造了時(shí)機(jī)與效益,就應(yīng)給予獎(jiǎng)勵(lì),這樣才能激勵(lì)情報(bào)人員的工作積極性。相反,若企業(yè)因?yàn)槲吹玫角閳?bào)而失去了機(jī)會(huì),則應(yīng)進(jìn)行教育與懲罰。情報(bào)系統(tǒng)應(yīng)該成為一個(gè)非常有活力的系統(tǒng)。這樣才算管理好了。

3 企業(yè)反情報(bào)活動(dòng)企業(yè)除了研究分析競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手情報(bào)、競(jìng)爭(zhēng)環(huán)境情報(bào)、競(jìng)爭(zhēng)策略情報(bào)、競(jìng)爭(zhēng)目標(biāo)情報(bào)以外,還需對(duì)本企業(yè)的情報(bào)進(jìn)行自我保護(hù),可采取以下措施:

(1)建立內(nèi)部人員情報(bào)保密制度。

(2)提高全員保密意識(shí),簽定保密協(xié)議。

(3)建立內(nèi)部技術(shù)保密制度。

(4)建立經(jīng)濟(jì)部門保密制度。

(5)建立宣傳保密制度。在產(chǎn)品文獻(xiàn)、產(chǎn)品展覽會(huì)、產(chǎn)品鑒定會(huì)、訂貨會(huì)、交易會(huì)等宣傳過(guò)程中,注意保密。

(6)建立廢品處理制度。

(7)建立產(chǎn)品保密制度與有形載體保密制度。

企業(yè)要生存,必須獲取競(jìng)爭(zhēng)性情報(bào)。現(xiàn)代企業(yè)注重情報(bào)信息工作,建立起好的信息工作模式,通過(guò)企業(yè)內(nèi)部信息機(jī)構(gòu)和外部信息源、信息咨詢機(jī)構(gòu)獲取競(jìng)爭(zhēng)性情報(bào),并對(duì)其收集的關(guān)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手、競(jìng)爭(zhēng)環(huán)境、競(jìng)爭(zhēng)策略的情報(bào)進(jìn)行深層次的研究,同時(shí)企業(yè)必須對(duì)競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)系統(tǒng)進(jìn)行良好的管理。管理是關(guān)鍵,只有建立了嚴(yán)格、有序、良好的管理系統(tǒng),才能使企業(yè)步入完善的發(fā)展軌道,而且CIO要有一定的素質(zhì),并作好反情報(bào)工作。只有這樣,才能使企業(yè)在競(jìng)爭(zhēng)中領(lǐng)先一步,蒸蒸日上。

1 曹建勛,張曼。 關(guān)于發(fā)展企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)情報(bào)業(yè)務(wù)的思考。 管理信息系統(tǒng),1995(1)

2 邸德海。 現(xiàn)代信息技術(shù)對(duì)企業(yè)組織的影響及其對(duì)策。 管理信息系統(tǒng),1997(4)

3 烏家培,秦海清。 競(jìng)爭(zhēng)信息和企業(yè)戰(zhàn)略。 中國(guó)工業(yè)經(jīng)濟(jì),1995(12)

4 俞曉軍。 信息革命與企業(yè)組織變革。 中國(guó)工業(yè)經(jīng)濟(jì),1996(6)

保密制度的意義范文第5篇

關(guān)鍵詞: 軍隊(duì)院校 保密工作 創(chuàng)新發(fā)展

總書記在黨的十七大報(bào)告中提出的科學(xué)發(fā)展觀,內(nèi)容豐富、內(nèi)涵深刻、論述精辟,是中國(guó)化的最新成果,是我國(guó)經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展的重要指導(dǎo)方針,也是部隊(duì)院校保密工作發(fā)展的行動(dòng)指南。全面深入學(xué)習(xí)領(lǐng)會(huì)和貫徹落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀,對(duì)做好當(dāng)前和今后一個(gè)時(shí)期的保密工作意義重大。我對(duì)如何深入學(xué)習(xí)貫徹落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀推進(jìn)軍隊(duì)院校保密工作創(chuàng)新發(fā)展談?wù)勼w會(huì)。

一、推進(jìn)院校保密工作發(fā)展必須堅(jiān)持以思想理念創(chuàng)新為先導(dǎo)

隨著全球經(jīng)濟(jì)、信息科技發(fā)展,特別是我國(guó)改革開(kāi)放及市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)向縱深推進(jìn),保密工作遇到了許多新情況、新問(wèn)題、新特點(diǎn)。要適應(yīng)新變化,迎接新挑戰(zhàn),保密工作必須堅(jiān)持科學(xué)發(fā)展,以思想理念的創(chuàng)新發(fā)展為先導(dǎo),這是保密工作發(fā)展的重要前提和基礎(chǔ)。所謂思想理念上的創(chuàng)新發(fā)展,就是要與時(shí)俱進(jìn),解放思想,突破傳統(tǒng)陳舊的、單一封閉的保密觀,確立全方位、多元化、高科技和開(kāi)拓性的保密思想。實(shí)現(xiàn)這一新的思想觀念,當(dāng)前必須克服“三種偏見(jiàn)”,即“無(wú)密可?!?、“有密難保”和“保密影響工作”的思想。應(yīng)樹(shù)立三個(gè)觀念:一是越是改革開(kāi)放,越要加強(qiáng)保密工作的觀念;二是保密就是“保安全,保發(fā)展”的觀念;三是善于把握新特點(diǎn)、新規(guī)律、破解新問(wèn)題的觀念。只有堅(jiān)持思想理念上的創(chuàng)新發(fā)展,把先進(jìn)保密思想灌注到每個(gè)學(xué)員的頭腦中,才能催生保密強(qiáng)勢(shì)動(dòng)力源。

二、強(qiáng)化院校保密工作必須堅(jiān)持把做人的工作置于首位

科學(xué)發(fā)展觀的核心是以人為本。在保密領(lǐng)域的發(fā)展,具體到工作管理,就是要以人為重點(diǎn)目標(biāo)。人既是保密工作管理者,又是保密工作管理對(duì)象。人是做好保密工作的基礎(chǔ),做好保密工作是事在人為。尤其對(duì)特定群體,更是管理目標(biāo)的重中之重。當(dāng)前應(yīng)著力從三個(gè)方面抓好:第一,抓人員。抓準(zhǔn)這個(gè)重點(diǎn),準(zhǔn)確確定要害部門的人員,明確崗位責(zé)任和要求,監(jiān)督其履行職責(zé)到位。第二,抓教育培訓(xùn)。部隊(duì)保密委員會(huì)要充分發(fā)揮本級(jí)機(jī)構(gòu)職能作用,重點(diǎn)抓好人員的保密教育培訓(xùn),要做到教育培訓(xùn)計(jì)劃、時(shí)間、人員“三落實(shí)”。通過(guò)抓教育培訓(xùn),全面提高人員的政治思想和業(yè)務(wù)素質(zhì),增強(qiáng)保密工作的服務(wù)意識(shí)、責(zé)任意識(shí)和憂患意識(shí)。同時(shí),也要努力做到“三個(gè)到位”。一是講到位。要堅(jiān)持不懈地對(duì)各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)干部和學(xué)員進(jìn)行經(jīng)常性的保密教育和保密提醒,講形勢(shì)、講責(zé)任、講危害,把保密工作的重要性講深,把保密工作面臨的嚴(yán)峻形勢(shì)講透,把有關(guān)人員的保密責(zé)任講清,把泄密的危害和后果講清楚。二是做到位。要把各項(xiàng)關(guān)于加強(qiáng)保密工作的各項(xiàng)方針政策和措施落到實(shí)處,特別是機(jī)構(gòu)人員要到位,技術(shù)裝備配備要到位,經(jīng)費(fèi)保障要到位。三是查到位。要善于運(yùn)用保密督查手段特別是技術(shù)檢查等硬手段,及早發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,及時(shí)糾正問(wèn)題,采取切實(shí)有效的措施堵塞漏洞,消除隱患。

三、抓好院校保密工作重點(diǎn)必須堅(jiān)持以制度變革發(fā)展為主體

新時(shí)期、新形勢(shì)保密工作,最突出的特點(diǎn)是信息技術(shù)高度發(fā)展和日新月異,這些使得保密工作的技術(shù)性成分進(jìn)一步突出。與過(guò)去保密工作相比較,在保密制度內(nèi)容、注意的重點(diǎn)和采取的措施等各個(gè)方面無(wú)不體現(xiàn)時(shí)代的明顯特征。因此,必須針對(duì)當(dāng)今時(shí)代保密工作的特點(diǎn),加大保密制度變革的力度,使它適應(yīng)滿足信息化條件下保密工作的需求。在保密制度建設(shè)上,一是要建立健全教育培訓(xùn)制度建設(shè)?,F(xiàn)階段,信息技術(shù)幾乎涉及我們工作和生活的方方面面,不知不覺(jué)就可能泄密,給個(gè)人、單位,甚至院校、國(guó)家造成不可彌補(bǔ)的損失和安全穩(wěn)定方面的嚴(yán)重后果。因此,必須建立對(duì)所有人員進(jìn)行相關(guān)教育培訓(xùn)的制度,使每一個(gè)人在從事工作之前,能夠詳盡地了解和掌握相關(guān)的保密知識(shí)和措施,做到有備無(wú)患。二是要加強(qiáng)管控制度的改革創(chuàng)新。對(duì)計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)等信息技術(shù)的管控,必須適應(yīng)它特點(diǎn)的技術(shù)管控手段和措施,以技術(shù)管技術(shù),以技術(shù)控制技術(shù),一系列管控制度要切實(shí)起到應(yīng)有的作用。三是建立健全有關(guān)責(zé)任和處罰制度。必須讓每一個(gè)人都明確自己的責(zé)任,尤其是出現(xiàn)問(wèn)題以后所承擔(dān)的責(zé)任,時(shí)時(shí)敲響警鐘,繃緊保密工作這根弦,消除任何僥幸和麻痹思想,引以為戒。